胰岛素是在胰岛β细胞中合成的，并以非恒定的方式分泌。葡萄糖是刺激胰岛素分泌最主要的因素，故进餐、饥饿均可引起胰岛素合成与分泌速率的变化。另外还受生长激素、肾上腺激素、胰高血糖素等激素的影响。正常参考值：空腹41.0±8.7μU/ml。
血清胰岛素增高多见于胰岛细胞瘤、家族性高胰岛素血症、肢端肥大症、Cushing综合征；血清胰岛素减低多见于Ⅰ型糖尿病、垂体功能低下、醛固酮增多症和嗜铬细胞瘤等。