（1）无菌操作。正常人尿道是无菌的，而外尿道除存在正常菌群如类白喉棒状杆菌、甲型链球菌等外，还常有大肠杆菌、肠球菌等存在，后者又是尿道感染中常见到的病原菌，所以做好尿液细菌学检验的主要问题就是严格无菌操作，才能排除污染。一般由三种以上细菌引起的尿路感染是罕见的，若尿液中培养有三种以上细菌生长往往由于留尿时或其它环节污染所致，所以细菌室检验时发现这种尿液，即报告为“标本污染，建议重留”。

　　（2）用抗菌药前采集。因治疗中所用药物或分解产物均通过尿液排泄，服药后抑制细菌生长，易导致培养假阴性。

　　（3）中段尿采集法。女性病人：成年女性先以肥皂水清洗外阴部，再以灭菌水洗净，灭菌沙布擦试，用手指将阴唇分开排尿，弃去前段，留取中段尿5～10毫升左右于灭菌容器内。男性病人：先用肥皂水洗尿道口，后用清水冲洗，就可留取中段尿。儿童采集中段尿避免污染比较困难。

　　（4）留取的尿液最好是第一次晨尿。因该尿液在膀胱中存留时间长，细菌数多，可提高培养的阳性率。至于临床症状严重的，也可留取随机尿。标本留取后最好立刻送检。

　　（5）膀胱穿刺法主要用于厌氧菌培养；结核杆菌检查留取24小时尿液，取沉淀部分送检。